Colbertova kariera se je začela v zgodnjih devetdesetih letih prejšnjega stoletja, ko je bil član improvizacijske komične skupine Second City. Nato je igral v več televizijskih oddajah, vključno z The Dana Carvey Show in Strangers with Candy. Leta 1999 je ustvaril lik Stephena Colberta, konservativnega političnega komentatorja, za serijo Comedy Central The Daily Show. Colbert je igral lik več let in postal eden najbolj priljubljenih komikov v ZDA.
Leta 2005 je Colbert zapustil The Daily Show in ustvaril lastno oddajo The Colbert Report. Oddaja je bila satirična informativna oddaja, v kateri je Colbert igral vlogo samopomembnega, desničarskega strokovnjaka. Oddaja je bila zelo uspešna in je prejela številne nagrade, vključno z večkratnimi nagradami Primetime Emmy in Peabody Awards.
Leta 2014 je Colbert končal The Colbert Report in prevzel vlogo gostitelja The Late Show s Stephenom Colbertom. Oddaja je tradicionalna poznonočna pogovorna oddaja, v kateri Colbert intervjuva zvezdnike, politike in druge goste. Oddaja je bila uspešna in je prejela številne nagrade, vključno z večkratnimi nagradami Primetime Emmy in Peabody Awards.
Poleg svojega dela na televiziji je Colbert napisal tudi več knjig, med drugim I Am America (And So Can You!) in America Again:Re-becoming the Greatness We Never Were. Nastopil je tudi v več filmih, vključno z Anchorman 2:The Legend Continues in Zoolander 2.
Colbert je nadarjen komik, pisatelj in producent, ki je pomembno vplival na ameriško kulturo. Je eden najbolj priljubljenih komikov v ZDA, njegovo delo pa so pohvalili tako kritiki kot občinstvo.